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NanoDrop Eight 是 Thermo Fisher Scientific 推出的一款多通道超微量分光光度計(jì)，專為高通量檢測(cè)設(shè)計(jì)。它能夠在一次運(yùn)行中同時(shí)檢測(cè) 8 個(gè)樣品，樣品需求量?jī)H需 1–2 微升，廣泛應(yīng)用于核酸、蛋白質(zhì)以及帶有熒光標(biāo)記物的分子定量分析。掌握其詳細(xì)操作步驟是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的關(guān)鍵。本章將從開(kāi)機(jī)準(zhǔn)備到結(jié)果導(dǎo)出，逐一解析操作流程。
設(shè)備檢查
確認(rèn)儀器電源、顯示屏及光學(xué)臂正常。
檢查檢測(cè)平臺(tái)是否干凈無(wú)殘留液體。
檢查八通道檢測(cè)孔是否無(wú)塵、無(wú)劃痕。
環(huán)境要求
放置在穩(wěn)固的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，避免震動(dòng)。
室溫保持在 20–25℃，濕度適中。
避免陽(yáng)光直射，保持干燥環(huán)境。
樣品準(zhǔn)備
提前配制檢測(cè)所需的核酸、蛋白質(zhì)或其他樣品。
使用去離子水或?qū)?yīng)緩沖液作為空白對(duì)照。
樣品濃度不宜過(guò)高，如超出范圍需稀釋。
移液器、無(wú)酶吸頭、無(wú)核酸污染操作環(huán)境。
電源開(kāi)啟
接通電源后按下開(kāi)關(guān)鍵，設(shè)備開(kāi)始自檢。顯示屏?xí)詣?dòng)加載主界面。
預(yù)熱光源
初次開(kāi)機(jī)或長(zhǎng)時(shí)間未使用時(shí)，需預(yù)熱 2–3 分鐘以穩(wěn)定光源。
軟件登錄
選擇用戶賬號(hào)進(jìn)入系統(tǒng)界面，方便保存和區(qū)分?jǐn)?shù)據(jù)。
基線校正
滴加 1–2 微升空白緩沖液于檢測(cè)平臺(tái)。
合上光學(xué)臂，選擇“Blank”進(jìn)行校正。
系統(tǒng)自動(dòng)記錄基線，保證后續(xù)結(jié)果準(zhǔn)確。
使用移液器取 1–2 μL 樣品，緩慢滴加在檢測(cè)孔中央。
確保液滴覆蓋檢測(cè)窗口，避免氣泡或液體外溢。
對(duì)于多樣品檢測(cè)，可依次加載 8 個(gè)孔位。
NanoDrop Eight 內(nèi)置多種模式：
核酸模式：在 260 nm 檢測(cè) DNA、RNA 濃度。
蛋白質(zhì)模式：在 280 nm 檢測(cè)蛋白濃度。
全波長(zhǎng)掃描：190–850 nm，獲取完整光譜。
熒光染料模式：針對(duì) Cy3、Cy5 等標(biāo)記物。
用戶根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇相應(yīng)模式。
合上光學(xué)臂，點(diǎn)擊“Start”。
儀器自動(dòng)進(jìn)行掃描，單次測(cè)定約需 5–10 秒。
結(jié)果包括吸光度、濃度、純度比值及光譜曲線。
濃度值：自動(dòng)計(jì)算并顯示。
純度比值：如 A260/A280、A260/A230，幫助評(píng)估樣品質(zhì)量。
光譜曲線：直觀展示吸收峰。
保存結(jié)果
點(diǎn)擊“Save”，結(jié)果自動(dòng)存入系統(tǒng)存儲(chǔ)器。
可按樣品編號(hào)或日期進(jìn)行命名。
導(dǎo)出數(shù)據(jù)
USB 接口導(dǎo)出：生成 Excel 表格或 PDF 報(bào)告。
網(wǎng)絡(luò)接口導(dǎo)出：可直接傳輸至實(shí)驗(yàn)室服務(wù)器。
批量處理
軟件支持多樣品曲線疊加對(duì)比。
自動(dòng)生成統(tǒng)計(jì)報(bào)告，含平均值、標(biāo)準(zhǔn)差。
檢測(cè)值不穩(wěn)定
原因：液滴未完全覆蓋窗口或有氣泡。
解決：重新取樣，確保操作規(guī)范。
純度比值偏低
原因：樣品中有鹽類、蛋白或有機(jī)物污染。
解決：重新提取或純化樣品。
濃度過(guò)高提示
原因：樣品吸光度超出檢測(cè)范圍。
解決：稀釋后重新檢測(cè)。
信號(hào)異常弱
原因：檢測(cè)平臺(tái)未清潔干凈。
解決：用無(wú)絨紙或去離子水清潔窗口。
清潔
每次測(cè)量后立即清潔檢測(cè)平臺(tái)。
使用去離子水或 70% 乙醇清洗，防止殘留。
關(guān)機(jī)保養(yǎng)
長(zhǎng)時(shí)間不使用應(yīng)關(guān)閉電源。
建議覆蓋防塵罩，避免灰塵進(jìn)入。
校準(zhǔn)與檢測(cè)
定期進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)溶液檢測(cè)，確認(rèn)性能。
必要時(shí)聯(lián)系廠家進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)。
RNA 檢測(cè)
滴加 RNA 樣品 2 μL，結(jié)果顯示濃度 150 ng/μL，A260/A280 值為 2.0，表明純度良好。
蛋白質(zhì)檢測(cè)
檢測(cè) BSA 溶液，結(jié)果濃度 2.4 mg/mL，符合實(shí)驗(yàn)預(yù)期。
多樣品檢測(cè)
同時(shí)加載 8 個(gè) DNA 樣品，短時(shí)間內(nèi)獲得完整檢測(cè)結(jié)果。
NanoDrop Eight 的操作步驟簡(jiǎn)潔明了，主要流程包括：
操作前準(zhǔn)備與基線校正；
樣品加載與模式選擇；
自動(dòng)檢測(cè)與結(jié)果查看；
數(shù)據(jù)保存與導(dǎo)出；
清潔與維護(hù)。
其優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在：
樣品體積極小，避免浪費(fèi)；
八通道同時(shí)檢測(cè)，大幅提高效率；
檢測(cè)結(jié)果直觀可靠，便于數(shù)據(jù)管理；
適用于核酸、蛋白質(zhì)及多種標(biāo)記分子。
通過(guò)規(guī)范的操作步驟，NanoDrop Eight 能夠?yàn)榭蒲腥藛T提供高效、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，成為分子生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的重要工具。
杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
