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NanoDrop Eight是賽默飛公司推出的一款多通道微量分光光度計，專為高通量核酸、蛋白及其他生物分子檢測設計。其獨特之處在于無需比色皿，僅需1~2 μL樣品即可完成檢測，同時具備寬廣的光譜掃描能力。光譜范圍是儀器最核心的性能參數之一，它決定了可檢測分子的種類、靈敏度及精確度。理解NanoDrop Eight的光譜范圍，不僅能幫助科研人員合理選擇實驗模式，還能確保實驗數據的可靠性與可重復性。
分光光度法通過測定樣品在特定波長下對光的吸收程度，進而推算物質的濃度或結構特征。其基本依據是比爾-朗伯定律：
A = εbc
其中：
A：吸光度
ε：摩爾吸光系數
b：光程長度
c：溶液濃度
光譜范圍決定了儀器能夠覆蓋的波長區間。不同物質在紫外區、可見區或近紅外區有特定吸收峰，只有在對應波長范圍內，才能準確檢測其濃度與特性。
紫外區：200~400 nm，常用于核酸、蛋白及有機分子檢測。
可見區：400~800 nm，主要用于顯色反應后的定量分析。
近紅外區：800 nm以上，多用于結構研究或雜質檢測。
NanoDrop Eight采用氙閃光燈作為光源，具備高強度、穩定性好和使用壽命長的特點。其脈沖式發光機制減少了熱效應對檢測的干擾。
NanoDrop Eight的光譜掃描范圍覆蓋 190 nm至850 nm。
190~230 nm：用于檢測蛋白中肽鍵吸收峰和部分有機溶劑背景。
230~320 nm：涵蓋核酸和芳香族氨基酸的特征吸收峰。
320~800 nm：適用于蛋白定量顯色法及各種比色反應。
800~850 nm：多用于背景修正與部分特殊檢測。
NanoDrop Eight利用光纖與固定光程系統設計，自動調整光程長度（0.05 mm、0.2 mm、1.0 mm等），實現高濃度樣品與低濃度樣品的兼容檢測。
波長：260 nm
檢測范圍：2 ng/μL~15000 ng/μL dsDNA
純度評估：260/280比值（核酸與蛋白雜質），260/230比值（核酸與有機物或鹽類雜質）。
光譜應用：完整光譜掃描可顯示峰形，幫助判斷樣品是否受污染。
直接檢測：280 nm（芳香族氨基酸吸收峰）。
染料法檢測：
考馬斯亮藍法：595 nm
BCA法：562 nm
Bradford法：一般取595 nm或562 nm
光譜應用：通過190~230 nm區間可進一步分析肽鍵信息。
波長：600 nm（OD600，用于細菌生長曲線）。
光譜意義：完整掃描有助于區分濁度與特定代謝產物吸收峰。
色素與代謝物：如血紅素在400~450 nm有強吸收。
納米材料：如金納米粒子在520 nm有等離子體共振峰。
環境與藥物分析：部分有機分子在300~500 nm范圍內具有特征吸收。
適用于常規濃度檢測，如核酸260 nm、蛋白280 nm。
260/280比值：判斷核酸樣品中蛋白污染。
260/230比值：判斷有機物或鹽離子污染。
在190~850 nm范圍內連續掃描，可獲得完整光譜曲線，用于質量控制和未知樣品分析。
NanoDrop Eight可自動縮短光程應對高濃度樣品，避免信號飽和。
核酸：260 nm處明顯峰值。
蛋白：280 nm峰值明顯，若230 nm處有較強吸收，提示鹽或有機物污染。
顯色反應：在對應波長有穩定峰值。
定量結果：ng/μL或mg/mL。
純度比值：260/280、260/230。
光譜曲線：可導出為CSV或圖像格式。
線性范圍：樣品吸光度應在0.1~1.5之間。
背景修正：自動扣除空氣或緩沖液背景信號。
原因：比對界面殘留、樣品不均勻。
解決：重新清潔檢測平臺，確保樣品均勻混勻。
原因：濃度過高，超出線性范圍。
解決：稀釋樣品后重新測定。
原因：光源壽命不足或環境干擾。
解決：檢查光源狀態，必要時更換。
每次檢測前先用純水清潔檢測平臺。
對于不同緩沖液，應先做空白掃描。
樣品量盡量一致，保持在1.5~2 μL。
重要樣品至少重復測量兩次，取平均值。
建立實驗室標準曲線數據庫，便于后續分析。
基因組學：確保DNA純度，保證下游測序質量。
蛋白質組學：準確測定蛋白濃度，保證電泳與質譜分析穩定。
微生物學：OD600監測細菌生長，結合代謝物光譜分析。
藥物研發：檢測候選分子的特征吸收峰。
環境監測：檢測水體中的污染物。
賽默飛NanoDrop Eight分光光度計的光譜范圍覆蓋190~850 nm，為核酸、蛋白及多種生物分子的檢測提供了堅實的基礎。從單波長檢測到全光譜掃描，從定量分析到質量控制，其寬光譜范圍賦予研究人員更多靈活性。只有在充分理解光譜范圍的前提下，合理選擇波長與檢測模式，才能保證實驗數據的準確性和可靠性。
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