NanoDrop Eight是賽默飛公司推出的多通道微量分光光度計,廣泛應用于核酸、蛋白及細胞溶液等生物分子檢測。其最大的優勢在于高通量測定,能夠同時檢測多達8個樣品,且僅需1~2 μL即可完成定量與純度分析。經過大量實際使用,研究人員在樣品準備、檢測操作、數據分析和日常維護方面積累了豐富的經驗,這些經驗有助于避免常見錯誤,提高實驗的準確性和效率。
將NanoDrop Eight放置在穩固的實驗臺面,遠離震動源與強電磁干擾設備。
實驗室溫度保持在20~25℃之間,濕度控制在60%以下,以確保光學元件不受潮。
開機預熱3~5分鐘后再進行檢測,使光源達到穩定狀態。
核酸樣品:溶解于無RNA酶、無DNA酶的緩沖液或水中,避免使用高鹽緩沖液。
蛋白樣品:使用PBS或Tris緩沖液,避免高濃度去污劑或有機溶劑。
細胞或菌液樣品:需均勻混勻,避免沉淀。
建議樣品濃度控制在儀器檢測范圍內,避免因濃度過高導致光程飽和。
每次檢測前先用無核酸酶水清洗測量平臺,并用無絨紙擦干。
對不同類型樣品,使用相應的空白對照進行校正。
使用移液器準確吸取1.5~2 μL樣品,滴在檢測平臺中央。
避免樣品形成氣泡,氣泡會導致光散射和曲線畸變。
樣品覆蓋檢測窗口后,應立即關閉上蓋,避免蒸發影響測定。
核酸檢測模式:以260 nm為主波長,同時記錄260/280和260/230比值。
蛋白檢測模式:可直接測280 nm吸收,或選擇顯色法(BCA、Bradford等)。
細菌密度測定:在600 nm檢測,繪制生長曲線。
全光譜掃描:適用于未知樣品或需評估純度的情況,覆蓋190~850 nm。
NanoDrop Eight支持8通道同步檢測,適合處理大量樣品。
實驗經驗表明,通道之間的差異極小,但為避免誤差,應統一樣品體積和上樣方式。
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