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賽默飛NanoDrop Eight是一款高通量微量分光光度計，能夠在190~850 nm波長范圍內快速測定核酸、蛋白及其他生物樣品的濃度與純度。其核心優勢是：
微量上樣：僅需1~2 μL樣品即可完成檢測；
多通道檢測：可同時分析8個樣品，極大提高效率；
自動光程調節：通過0.2 mm與1.0 mm光程切換，覆蓋更寬濃度范圍；
直讀結果：自動計算濃度并提供純度比值。
在分子生物學實驗中，NanoDrop Eight廣泛用于DNA提取、RNA定量、蛋白純化質量判定以及下游實驗（PCR、測序、轉染等）的樣品質量把控。因此，建立一套完善的質量控制體系，是確保實驗結果可靠的關鍵。
質量控制（Quality Control, QC）在NanoDrop Eight檢測中起到以下作用：
保證數據準確性：減少因操作誤差、樣品污染或設備波動導致的偏差；
提升實驗可重復性：相同樣品在不同批次檢測中應得到一致結果；
確保下游實驗順利進行：高質量的核酸或蛋白樣品是分子克隆、轉錄組測序和蛋白質組學實驗的前提；
符合實驗室規范：科研與檢測機構需符合GLP、ISO等質量標準，NanoDrop檢測數據往往作為樣品質量憑證。
核酸：提取后應避免蛋白和鹽類殘留，可通過柱式純化或酚氯仿抽提進一步去除雜質。
RNA：需在無RNA酶環境中操作，保持樣品完整性。
蛋白：樣品緩沖液應透明無渾濁，避免含有過量去垢劑或高鹽。
每次上樣量：1.5~2.0 μL，確保完全覆蓋檢測窗口。
避免氣泡：氣泡會導致光路異常，造成結果偏差。
樣品混勻：濃度不均勻會導致不同孔位結果差異大。
檢測后清潔：用無絨紙巾輕輕擦拭，避免殘留造成交叉污染。
使用與樣品相同緩沖液作為Blank，扣除背景信號。
每一批樣品檢測前均需進行一次空白校正。
NanoDrop Eight采用氘燈與鎢燈組合光源，190~850 nm全覆蓋。
定期校驗光源強度，避免因燈絲衰減導致基線漂移。
確認自動光程切換功能正常，防止濃度過高時出現信號飽和。
選擇檢測模式（核酸、蛋白、多肽、熒光等）；
進行空白校正；
依次加載樣品，獲取吸光度曲線與濃度數值；
系統自動給出純度比值和質量評價。
核酸：
A260/A280 = 1.8~2.0 → 高純度DNA或RNA
A260/A230 > 2.0 → 雜質少，適合下游實驗
蛋白：
A280吸收峰清晰，無額外干擾峰
濃度在實驗設計范圍內
NanoDrop Eight通過光程自動調節，保證了高濃度與低濃度樣品的準確檢測。但仍需遵循：
樣品濃度應在0.1~1.5 A的線性范圍；
結果最好取三次測量平均值，減少偶然誤差。
核酸：
A260/A280 < 1.8：蛋白或酚污染
A260/A230 < 2.0：鹽、碳水化合物或緩沖液殘留
蛋白：
280 nm有明顯吸收峰，若在230 nm有額外峰值，可能為緩沖液干擾。
不僅要看數值，還需查看光譜：
DNA/RNA應在260 nm有明顯吸收峰；
蛋白應在280 nm有峰；
若出現異常雙峰或雜散峰，應懷疑有污染。
原因：上樣不均、氣泡、窗口未清潔
解決：確保移液準確、及時擦拭檢測窗口
原因：樣品降解或濃度超出檢測下限
解決：檢查樣品完整性，必要時濃縮處理
原因：蛋白污染
解決：柱式純化去除蛋白殘留
原因：鹽或有機溶劑殘留
解決：乙醇沉淀或二次洗滌
原因：窗口殘留物或交叉污染
解決：每次測量后徹底清潔
明確NanoDrop Eight檢測的標準操作流程
包含：開機校準、樣品制備、上樣規范、數據記錄、清潔維護
使用標準DNA或BSA溶液進行方法學驗證
每月進行一次光源校準，保證結果穩定
所有檢測結果需保存至LIMS或數據庫
保證數據可追溯，符合實驗室質量管理要求
新進實驗人員需經過NanoDrop操作培訓與考核
定期復訓，減少人為操作偏差
NanoDrop Eight作為高通量微量分光光度計，在核酸、蛋白及多種生物樣品的質量檢測中發揮著重要作用。其結果不僅用于濃度測定，更是下游實驗成功與否的重要前提。
要實現可靠的檢測，必須在以下環節實施質量控制：
樣品制備與上樣的規范化；
空白校正與光源穩定性的監測；
數據解讀中的純度比值與光譜曲線分析；
實驗室SOP、校準、數據管理與人員培訓的制度化建設。
通過全流程質量控制，NanoDrop Eight不僅能提供快速高效的檢測結果，更能保證實驗數據的真實性與可靠性，為科研和臨床應用提供堅實的數據基礎。
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