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賽默飛BioMate 160分光光度計是一款紫外-可見光譜分析儀，主要通過測定物質對特定波長光的吸收或透射情況來推斷其濃度和結構特征。其核心原理基于比爾-朗伯定律（Beer-Lambert Law）：
A=ε?c?lA = \varepsilon \cdot c \cdot lA=ε?c?l
其中：
AAA 為吸光度
ε\varepsilonε 為摩爾消光系數
ccc 為溶液濃度
lll 為光程長度
BioMate 160采用氘燈（覆蓋紫外區）和鎢燈（覆蓋可見區），結合單色器選擇不同波長，檢測器則測量樣品對光的吸收強度。通過不同模式設定，可實現核酸定量、蛋白濃度測定、酶活性分析、溶液透光率測試等多種實驗。
確認電源穩定，預熱15~20分鐘，使光源穩定。
檢查比色皿是否潔凈透明，無刮痕或氣泡。
打開操作界面，進行系統自檢。
在所有實驗前均需進行空白對照測量：
使用與樣品相同的溶劑作為參比液。
在設定波長下調零，保證透過率為100%或吸光度為0。
確保樣品濃度在儀器檢測范圍內，避免過高或過低。
樣品體積需足夠覆蓋光路，液面高于光束高度。
避免顆粒懸浮或沉淀，必要時進行過濾或離心。
最常見的模式，用于快速定量分析。
設置方法：輸入目標波長（如260 nm或280 nm）。
應用實例：核酸濃度檢測（A260），蛋白檢測（A280）。
優點：操作簡單、快速。
用于同時測定多個波長下的吸光度。
設置方法：設定2~10個波長（如260 nm、280 nm、230 nm）。
應用實例：核酸純度分析（A260/A280、A260/A230比值）。
優勢：一次檢測可獲得多參數結果。
獲取全波段吸收曲線。
設置方法：設定起始波長、終止波長及掃描間隔（如200~800 nm，1 nm間隔）。
應用實例：化合物結構研究、色素溶液吸收峰分析。
特點：適合未知樣品分析。
用于實時監測吸光度隨時間的變化。
設置方法：設定波長（如340 nm），采樣間隔（如5秒），總時間（如10分鐘）。
應用實例：酶促反應速率測定，如NADH氧化檢測。
優勢：能直接計算酶活性參數。
利用標準物質建立濃度-吸光度曲線，再測定未知樣品濃度。
步驟：
配制一系列已知濃度標準溶液
在指定波長下測量吸光度
繪制標準曲線，回歸分析獲得方程
測定未知樣品并代入計算
應用實例：蛋白定量（Bradford、BCA法）、多酚含量測定。
用于透明度、濁度或材料透光性研究。
設置方法：選擇%T模式，設定目標波長。
應用實例：水質檢測、薄膜透光率測試。
波長：260 nm、280 nm、230 nm
判定標準：
DNA純度：A260/A280 ≈ 1.8
RNA純度：A260/A280 ≈ 2.0
A260/A230值應在2.0以上，過低提示有鹽或有機溶劑污染。
直接法：A280測定，適合純化后的蛋白溶液。
間接法：Bradford法（595 nm）、BCA法（562 nm）。
標準曲線：以牛血清白蛋白（BSA）為標準品。
實例：乳酸脫氫酶（LDH）檢測
波長：340 nm，檢測NADH吸光度下降
方法：設定動力學模式，計算單位時間吸光度變化速率。
對未知樣品進行全波段掃描，尋找吸收峰。
結合標準品光譜進行比對，推斷樣品成分。
食品色素分析：掃描200~600 nm，確定色素吸收峰。
水質檢測：測定COD相關物質在特定波長下的吸收強度。
BioMate 160提供多種結果處理方式：
直接讀取：顯示屏實時顯示吸光度或濃度。
數據導出：通過USB或打印機輸出。
軟件分析：進行峰值分析、曲線擬合、酶學計算。
標準曲線擬合：線性回歸計算R2，確保>0.99。
基線校正：扣除溶劑或空白對照值。
平滑處理：去除噪聲干擾，提高光譜清晰度。
樣品必須澄清透明，避免雜質影響光路。
比色皿方向統一，避免因光程差異帶來誤差。
低濃度樣品需用窄帶寬、慢速掃描。
酶動力學實驗避免溫度波動，建議結合恒溫系統。
樣品濃度過高需稀釋，使吸光度落在0.1~1.0范圍。
信噪比優化
選擇適合帶寬和掃描速度，重復測定取平均值。
自動化批量檢測
與進樣器配合，實現高通量分析。
結果可追溯性
保存原始數據文件，確保實驗可重復驗證。
方法學驗證
對于關鍵檢測，需進行精密度、線性范圍、檢出限等方法學評估。
賽默飛BioMate 160分光光度計提供多種測量方法，涵蓋固定波長、多波長、光譜掃描、動力學檢測、定量分析和透過率測量。正確的實驗準備與合理的參數設置，是獲得準確可靠結果的關鍵。
在實際應用中，BioMate 160能夠滿足核酸蛋白定量、酶活性分析、藥物成分檢測、食品安全檢測和環境監測等多樣化需求。通過科學的操作流程和數據處理策略，研究人員不僅能獲得精確的數值結果，還能建立穩定可靠的實驗方法，為科研和檢測提供堅實的數據支持。
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