賽默飛分光光度計 BioMate 160 是一款高性能的紫外-可見光分光光度計,主要用于對樣品在不同波長下的光吸收強度進行精確測量。光度測量是該設備最基礎、也是最常用的功能之一,通過檢測樣品對光的透過和吸收情況,研究者能夠快速獲得物質的濃度信息及相關理化特性。
在現代實驗室中,光度測量廣泛應用于核酸、蛋白質定量,酶動力學實驗,微生物生長曲線繪制,以及食品檢測、藥物分析和環境監測等多個領域。BioMate 160 以其波長范圍廣、測量精度高、操作簡便和結果可靠的優勢,成為科研和教學的重要工具。
光照射到物質時,部分光子會被吸收,部分會透射或散射。分光光度計通過測量透射光強度與入射光強度的比值,推導出物質的吸光度。
吸光度(A)與溶液濃度(c)及光程(l)成正比,遵循朗伯-比爾定律:
A = ε × c × l
其中,ε 為摩爾吸光系數,是物質在特定波長下的吸收能力。
通過吸光度值判斷樣品濃度;
通過多點測定繪制標準曲線,進行定量分析;
通過吸收光譜掃描,判斷樣品特征吸收峰。
覆蓋 190–1100 nm,可滿足紫外與可見光區的各種檢測需求。
誤差小于 ±1 nm,確保光度測量的準確性。
2 nm 光譜帶寬,兼顧分辨率與透光率。
采用氘燈與鎢燈組合:
氘燈:適用于紫外區(190–350 nm);
鎢燈:適用于可見光和近紅外區(350–1100 nm)。
固定波長光度測量:在單一波長下測定樣品吸光度;
多波長光度測量:可在多個波長下同時獲取數據;
掃描模式:自動掃描全光譜,繪制吸收曲線;
定量分析:結合標準曲線進行濃度計算;
動力學模式:實時監測吸光度隨時間的變化。
打開電源,選擇合適的光源;
光源預熱 10–15 分鐘,確保穩定。
選擇石英比色皿(紫外區測定)或光學玻璃比色皿(可見區測定);
檢查比色皿清潔度,避免指紋、水滴或殘留雜質。
樣品溶液應澄清無氣泡;
吸光度在 0.1–1.0 之間為最佳范圍;
根據需要進行稀釋或純化。
使用相同溶劑作為參比液,置入參比比色皿;
儀器設置為零點校正,以消除溶劑吸收對結果的影響。
將樣品比色皿置入樣品槽,設定波長;
記錄吸光度或透過率值;
可選擇單波長、多波長或掃描測量。
對核酸和蛋白質,可根據標準公式換算濃度;
對復雜樣品,建議繪制標準曲線進行比對。
稀釋樣品避免吸光度過高;
使用緩沖液保持樣品穩定;
防止光敏感樣品暴露在強光下。
確保比色皿擺放方向一致;
采用重復測量,減少偶然誤差;
對動力學實驗,應保持溫度恒定。
定期更換光源,保證光強穩定;
定期進行波長校準;
使用專用清潔布清理光學窗口。
吸光度過高 (>2.0)
解決:稀釋樣品,保持在檢測線性范圍內。
基線漂移
可能原因:光源未穩定、比色皿不干凈;
解決:延長預熱時間,清洗比色皿。
重復性差
可能原因:操作不規范,樣品分層;
解決:混勻樣品,保持操作一致。
核酸/蛋白質純度異常
A260/A280 比值偏離正常值;
解決:重復提取或進一步純化。
在 260 nm 測量吸光度,利用公式計算濃度;
A260/A280 比值用于判斷純度。
280 nm 測定蛋白質天然吸收;
595 nm 使用考馬斯亮藍法測定。
在特定波長監測反應產物吸收變化;
計算酶速率常數。
600 nm 測量濁度(OD600);
繪制生長曲線。
藥物降解曲線測定;
水體中有機物檢測(如 COD 相關比色法)。
科研價值
支持分子生物學、藥學、環境科學等研究;
提供快速、準確的數據支持。
教學價值
演示光譜學原理;
幫助學生理解吸光度與濃度關系。
應用廣度
從基礎化學到臨床檢測均可使用;
支撐跨學科實驗設計。
自動化擴展
與自動進樣器聯用,實現高通量檢測。
微量樣品檢測
支持 1–2 μL 樣品的精確定量。
信息化結合
數據實時上傳實驗室管理系統;
支持云端共享與遠程分析。
賽默飛分光光度計 BioMate 160 在光度測量方面具備高精度、廣波長范圍和多功能模式,能夠滿足科研、教學及工業檢測的多樣化需求。通過優化樣品準備、操作條件和數據分析,可顯著提升實驗準確性與重復性。作為實驗室的重要設備,它不僅是一臺檢測儀器,更是推動科學研究與技術創新的重要支撐平臺。
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