歡迎進入 NanoDrop Eight 分光光度計的操作演示。本視頻將帶領(lǐng)大家完整了解這臺設(shè)備的功能、準備步驟、樣品上機方法、數(shù)據(jù)讀取與導出,以及日常使用中的維護與注意事項。通過本視頻學習,用戶能夠熟練掌握 NanoDrop Eight 的操作流程,從而高效完成核酸、蛋白質(zhì)及其他生物樣品的定量檢測。
NanoDrop Eight 是 Thermo Fisher 推出的多通道超微量分光光度計,可同時檢測 8 個樣品。它繼承了 NanoDrop 系列的“無比色皿”設(shè)計理念,僅需 1–2 微升樣品即可完成檢測,極大地節(jié)省了寶貴的實驗材料。
設(shè)備由以下幾個部分組成:
上臂與檢測平臺:上臂包含光源與檢測器,下方檢測平臺為樣品接觸區(qū)域。
八通道檢測陣列:可同時加載 8 個樣品,實現(xiàn)高通量測定。
觸控操作界面:直觀的圖形化菜單,便于快速設(shè)定檢測模式。
USB 與網(wǎng)絡(luò)接口:用于數(shù)據(jù)存儲、導出與軟件更新。
電源連接
將電源適配器插入插座,按下電源鍵,系統(tǒng)啟動進入主界面。
預熱與校準
初次開機需等待光源穩(wěn)定,約 2–3 分鐘。隨后按照屏幕提示進行基線校準,使用純水或空白緩沖液作為參比。
軟件登錄
進入操作界面后,選擇用戶賬號。不同用戶可保存獨立方法與數(shù)據(jù),便于實驗室多人使用。
樣品體積
每孔僅需 1–2 微升,避免溶液過多導致覆蓋光路外溢。
樣品類型
支持核酸、蛋白質(zhì)、熒光標記分子以及細胞懸液。
樣品加載
使用移液器小心將樣品滴加在檢測平臺的光學窗口上,避免產(chǎn)生氣泡。對于 8 通道檢測,可依次加載各孔,完成后輕合上臂。
參比溶液
在正式檢測前,需加載相應的空白溶液作為背景校正。
模式選擇
在觸控屏幕上選擇檢測模式:核酸、蛋白質(zhì)、熒光染料或全波長掃描。
波長設(shè)定
核酸檢測:常設(shè)定 260 nm。
蛋白檢測:常設(shè)定 280 nm。
熒光檢測:可在 450–650 nm 范圍內(nèi)選擇。
光譜掃描:可覆蓋 190–850 nm。
開始檢測
按下“Start”鍵,設(shè)備自動完成樣品掃描。整個過程僅需 5–10 秒即可輸出結(jié)果。
數(shù)據(jù)展示
儀器會在屏幕上顯示:
吸光度值
樣品濃度
純度比值(A260/A280、A260/A230)
光譜曲線
結(jié)果保存
檢測完成后,可選擇保存結(jié)果到本地存儲器,并按樣品編號自動命名。
數(shù)據(jù)導出
通過 USB 移動存儲導出數(shù)據(jù)。
通過網(wǎng)絡(luò)接口直接傳輸至實驗室電腦或服務器。
支持生成表格、曲線圖或報告格式。
多樣品比對
軟件支持將多個樣品的光譜曲線疊加對比,用于判斷批次間差異。
清潔
每次測量后應用無絨紙或柔軟布輕輕擦拭光學平臺,必要時使用去離子水或 70% 乙醇清潔。
避免殘留
蛋白質(zhì)和核酸樣品殘留會導致交叉污染,務必在檢測間隙清潔光學表面。
光源壽命
長時間不使用時應關(guān)閉電源,延長光源壽命。
定期校準
實驗室應根據(jù)使用頻率,定期進行校準與性能驗證,保證數(shù)據(jù)準確性。
RNA 質(zhì)量控制
上機前準備 RNA 樣品,滴加 2 微升。
選擇核酸模式,檢測 A260/A280 值。
輸出結(jié)果顯示濃度為 100 ng/μL,純度比值 2.0,說明 RNA 純度較高。
蛋白質(zhì)濃度檢測
使用 A280 吸收模式檢測蛋白溶液。
結(jié)果顯示濃度為 2.5 mg/mL,A260/A280 比值 0.58,符合蛋白樣品特征。
熒光標記分子檢測
選擇全波長掃描模式,檢測 450–650 nm 區(qū)間。
獲得特征峰 550 nm,說明熒光分子成功標記。
高通量樣品檢測
一次加載 8 個 DNA 樣品,幾分鐘內(nèi)完成全部檢測。
軟件自動生成批量報告,便于后續(xù)分析。
分子生物學研究
PCR、測序前的核酸濃度校正。
蛋白質(zhì)組學
蛋白質(zhì)純化產(chǎn)物濃度與純度測定。
臨床檢測
生物體液樣本的核酸、蛋白質(zhì)含量分析。
藥物研發(fā)
藥物制劑中活性分子的光譜監(jiān)測。
通過本操作視頻介紹,我們了解了 NanoDrop Eight 的全流程使用:
從開機準備到樣品加載;
從檢測模式選擇到數(shù)據(jù)輸出;
從日常維護到實際應用案例。
NanoDrop Eight 的優(yōu)勢在于高通量檢測、微量樣品需求、快速輸出結(jié)果與智能數(shù)據(jù)處理。它不僅適用于分子生物學與蛋白質(zhì)研究,也在臨床醫(yī)學、藥物研發(fā)和環(huán)境監(jiān)測中展現(xiàn)出廣闊應用前景。
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