分光光度計是分析化學、生命科學、臨床檢測和環(huán)境監(jiān)測中最常用的實驗設備之一。它通過測量物質(zhì)對不同波長光的吸收、透過或反射特性,實現(xiàn)對樣本成分的定性與定量分析。賽默飛Evolution One作為一款先進的紫外-可見分光光度計,設計時充分考慮了科研和應用檢測的多樣需求,內(nèi)置多種測量模式,用戶可以根據(jù)實驗目標靈活選擇,既能滿足基礎研究的常規(guī)檢測,又能應對復雜實驗方案的深入分析。
為了滿足不同科研和應用場景的需求,Evolution One分光光度計通常支持以下幾類主要測量模式:
光譜掃描模式(Spectrum Scan)
定量測定模式(Quantitative Analysis)
動力學測定模式(Kinetics)
時間掃描模式(Time Scan)
DNA/RNA與蛋白質(zhì)專用模式
多波長測定模式(Multi-Wavelength)
光度模式(Photometric Mode)
方法開發(fā)與自定義模式
下面將對各個模式的原理、操作方法、應用價值進行詳細介紹。
光譜掃描模式主要用于測定樣品在一定波長范圍內(nèi)的吸收或透過特性。通過對190–1100 nm范圍的連續(xù)掃描,可以獲得完整的光譜曲線,幫助研究者判斷物質(zhì)的特征吸收峰。
設置掃描波長范圍,例如200–800 nm;
選擇掃描速度與數(shù)據(jù)間隔;
插入樣品與空白對照;
儀器自動繪制吸收光譜曲線。
蛋白質(zhì)和核酸最大吸收峰位置的確認;
染料、涂料、顏料的光譜特征分析;
藥物溶液穩(wěn)定性研究。
基于比爾-朗伯定律(A=ε·c·l),通過吸光度與濃度的線性關系建立標準曲線,對未知樣品進行濃度測定。
準備系列標準溶液,測定其吸光度;
軟件自動生成標準曲線;
輸入未知樣品數(shù)據(jù),儀器計算濃度。
測定DNA或RNA樣本濃度;
藥物活性成分的定量檢測;
食品中添加劑或營養(yǎng)成分的濃度分析。
動力學測定主要記錄樣品吸光度隨時間變化的過程,常用于酶動力學研究。通過設定時間間隔和總時長,儀器可自動生成動力學曲線。
選擇目標波長(通常為底物或產(chǎn)物的最大吸收峰);
設置測量間隔(如每5秒測定一次);
加入酶和底物,立即開始測試;
儀器輸出反應曲線,可計算反應速率。
酶活性檢測與動力學參數(shù)計算;
藥物代謝速率研究;
環(huán)境樣品中生物反應監(jiān)測。
與動力學類似,但時間掃描通常用于長時間監(jiān)控某一波長下樣本信號的變化,適合穩(wěn)定性研究。
設定固定波長,如260 nm;
設置掃描時間段(幾分鐘至數(shù)小時);
儀器連續(xù)采集吸光度信號并繪制時間曲線。
藥物溶液在光照或儲存條件下的穩(wěn)定性;
納米材料在分散介質(zhì)中的聚集行為;
生物反應過程的長時間跟蹤。
核酸和蛋白質(zhì)有特定的吸收峰:DNA和RNA在260 nm吸收最強,蛋白質(zhì)在280 nm吸收最強。通過比值(A260/A280),可以判斷樣品純度。
選擇核酸或蛋白質(zhì)模式;
設定檢測體積,可支持微量比色皿(僅幾微升);
軟件自動計算濃度和純度指標。
分子生物學實驗中的DNA/RNA提取質(zhì)量控制;
蛋白質(zhì)純化過程的定量分析;
轉(zhuǎn)基因研究和臨床樣本檢測。
在多個特定波長同時測量吸光度,適用于復雜樣本中多組分的檢測。
選擇2–6個波長;
設置樣本數(shù)量;
儀器自動輸出多波長數(shù)據(jù),并可進行多元分析。
食品添加劑的混合組分檢測;
多組分藥物制劑的含量分析;
環(huán)境樣品中多污染物的監(jiān)測。
光度模式是最基礎的功能,用于在單一波長下測定樣品的吸光度或透光率,適合快速檢測。
選擇單一波長;
插入空白和樣品比色皿;
儀器顯示吸光度(Abs)或透過率(%T)。
快速測定溶液濃度;
質(zhì)量控制中的常規(guī)檢測;
現(xiàn)場實驗的快速篩查。
該模式允許用戶根據(jù)特定需求自定義實驗步驟和分析方法,尤其適合非標準化樣品和復雜研究任務。
自定義掃描范圍、步長、速度;
支持多參數(shù)分析與批量測試;
可保存方法并重復調(diào)用,適合長期研究。
新型藥物篩選;
復雜體系的光學行為研究;
高通量實驗室的數(shù)據(jù)自動化采集。
測量模式 | 優(yōu)勢 | 典型應用 |
---|---|---|
光譜掃描 | 獲取完整光譜信息 | 樣品特征峰分析 |
定量測定 | 精準濃度測定 | 藥物、核酸定量 |
動力學測定 | 反應速率研究 | 酶動力學 |
時間掃描 | 長時監(jiān)控 | 藥物穩(wěn)定性 |
DNA/RNA/蛋白模式 | 一鍵分析,操作簡便 | 分子生物學 |
多波長測定 | 多組分檢測 | 食品、環(huán)境檢測 |
光度模式 | 快速便捷 | 日常常規(guī)檢測 |
自定義模式 | 靈活高效 | 創(chuàng)新研究 |
智能化與自動化
未來分光光度計將進一步結(jié)合AI算法,自動識別光譜特征,減少人工操作。
微量與高通量
支持納升級樣品檢測和多孔板測量,滿足分子生物學和藥物篩選需求。
遠程監(jiān)控與云數(shù)據(jù)
實驗數(shù)據(jù)可直接上傳至云端,實現(xiàn)遠程分析和團隊共享。
多功能集成
可能與熒光、化學發(fā)光等檢測方式結(jié)合,形成一體化分析平臺。
賽默飛分光光度計Evolution One憑借其多樣化的測量模式,極大地拓展了實驗室的研究與檢測能力。從基礎的單波長光度測試到復雜的動力學與多組分分析,每一種模式都服務于特定實驗需求,確保用戶能夠高效、精準地獲取所需數(shù)據(jù)。這種靈活性與可靠性不僅提升了科研工作的效率,也推動了生命科學、醫(yī)學、環(huán)境監(jiān)測和工業(yè)質(zhì)量控制等多個領域的發(fā)展。
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