分光光度法是分析化學和生命科學中最常見的檢測方法之一,能夠通過物質對特定波長光的吸收情況來進行定量和定性分析。賽默飛分光光度計 BioMate 160 是一款集精確性、穩定性與易操作性于一體的 UV-Vis 分光光度計,被廣泛應用于生物醫藥、食品檢測、環境監測和材料科學等領域。
要想發揮 BioMate 160 的最大性能,必須掌握科學規范的操作方法。本指南將為用戶提供完整的操作流程,從設備準備、參數設置到數據處理,結合常見問題解決與維護保養,幫助用戶快速熟悉并高效使用該設備。
BioMate 160 采用紫外-可見光檢測原理,波長覆蓋范圍為 190–1100 nm,能夠完成核酸、蛋白質、酶學反應以及化學物質的光譜分析。其主要特點包括:
光學性能穩定:采用氘燈和鎢燈雙光源,保障全波段檢測能力。
多功能檢測模式:支持定量分析、波長掃描、動力學測定、多波長測試。
軟件界面直觀:菜單化操作設計,支持多種數據格式導出。
數據可靠性高:具備基線校正、曲線擬合與背景扣除功能。
在操作 BioMate 160 之前,需做好以下準備:
確認電源接通,電源線與保險絲完好。
打開比色皿倉,檢查是否有灰塵或殘留液體。
檢查光源壽命,若使用時間過長,應提前準備備用燈。
保持實驗室溫度 20–25℃,濕度 40–60%。
避免陽光直射與強磁場干擾。
保持操作臺整潔,防止試劑濺入樣品倉。
配制合適的緩沖液與標準溶液。
檢查比色皿是否清潔透明。
準備移液器、吸頭等常用耗材。
接通電源,打開儀器開關。
等待系統自檢,確認光源與光路無異常。
預熱 15–30 分鐘,保證光源穩定。
打開配套軟件,選擇用戶身份進入主界面。
根據實驗需求選擇相應模塊:
定量分析:核酸、蛋白濃度測定。
波長掃描:繪制吸收光譜。
動力學:檢測反應隨時間的變化。
多波長測試:同時檢測多個波長。
將比色皿或微量檢測附件放入樣品倉。
使用緩沖液或空白對照作為 baseline,點擊“調零”。
逐一放入待測樣品,點擊“開始測量”。
波長范圍:如 200–800 nm。
掃描速度:可選擇快速、中速、慢速。
積分時間:延長積分時間可提高信噪比。
采樣間隔:動力學實驗需合理設置間隔。
軟件自動顯示吸光度曲線或表格數據。
對結果可進行平滑、擬合或基線校正。
保存為 CSV、TXT、PDF 等格式,或直接打印報告。
標準曲線法
在定量模塊中輸入標準溶液濃度,繪制吸光度-濃度曲線。
系統自動計算相關系數,并用于未知樣品濃度換算。
核酸純度判定
通過 A260/A280 比值判斷純度:1.8–2.0 表示較高純度。
蛋白質測定
紫外法:280 nm 吸收峰直接計算濃度。
Bradford 法:595 nm 測定,結合標準曲線換算。
動力學分析
通過曲線斜率計算酶活性或反應速率。
多波長比較
同時獲得多個波長的吸收值,用于復雜體系定量或雜質判定。
吸光度值過高
樣品濃度過大,需稀釋后重測。
基線漂移
光源老化或溫度不穩,應更換光源或延長預熱。
重復性差
可能因比色皿未清潔、移液誤差或樣品混勻不足。
軟件無法連接儀器
檢查 USB 連接線和驅動程序。
曲線噪聲大
適當延長積分時間,降低掃描速度。
光源維護
定期檢查使用時間,超過壽命需及時更換。
比色皿管理
使用后立即清洗并烘干,避免殘留影響。
光路清潔
使用無水乙醇與無塵布定期擦拭光路窗片。
軟件升級
定期檢查更新,獲取最新功能與補丁。
存儲管理
定期備份實驗數據,避免丟失。
在 260 nm 下測定吸光度。
軟件自動換算 DNA 濃度,并結合 A260/A280 判斷純度。
使用 Bradford 顯色法,在 595 nm 下測定吸光度。
繪制標準曲線,換算未知樣品濃度。
設置動力學模式,采樣間隔 10 秒,總時長 10 分鐘。
曲線斜率即為反應速率。
在 200–800 nm 范圍內掃描,識別特征吸收峰。
賽默飛 BioMate 160 分光光度計具備 操作簡便、功能齊全、數據可靠 等優勢。通過嚴格遵循操作指南,用戶可以快速完成從樣品準備、參數設置到數據分析的全流程,保證實驗結果的準確性與可重復性。
在操作過程中,應注重 對照設置、樣品處理與參數調整,避免因操作不當帶來的誤差。
在維護方面,應堅持 光源管理、比色皿清潔、數據備份,保障設備長期穩定運行。
在應用方面,BioMate 160 不僅能滿足常規的核酸與蛋白質檢測,還可擴展至環境檢測與材料科學研究,具有廣泛適用性。
通過科學規范的使用和管理,BioMate 160 將成為實驗室中可靠的分析工具,為科研和檢測工作提供高效支持。
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