現貨現發隔天到達
真人真事真本事
咨詢熱線13158823830
咨詢熱線13158823830
伯樂（Bio-Rad）Gene Pulser Xcell 電穿孔系統（包括1652660型號） 的快速操作指導，適用于日常基因轉染實驗。此流程為標準化操作簡要，幫助用戶快速、高效、安全地完成一次完整的電穿孔實驗：
檢查組件連接
確保主機、CE 模塊（用于指數波）或 PC 模塊（用于方波）已正確連接；
ShockPod 電擊槽已插入主機并就位；
電源線連接穩固，打開主電源開關。
預熱細胞與緩沖液
使用專用電穿孔緩沖液（如 Bio-Rad Gene Pulser Buffer）；
細胞應處于對數生長期，低鈣無血清狀態最佳；
樣品溫度控制在冰上或4℃，電穿孔后立即恢復至37℃。
混合樣品
合適濃度的細胞（約1×10?）；
質粒DNA或RNA（通常為0.1–10 μg）；
緩沖液補足至合適體積（10–500 μL，依據電擊杯大小）。
在1.5 mL無酶管中加入：
去除氣泡
輕輕彈擊比色皿或使用微量離心，確保無氣泡；
將混合液轉移至電擊杯中（0.2 cm / 0.4 cm 電極間距視細胞類型選擇）。
選擇波形模式
真核細胞：選擇 指數波（Exponential Decay）；
原核細胞（細菌、酵母）：選擇 方波（Square Wave）。
設定參數（參考值）
電壓：1,800–2,500 V（0.2 cm 杯）；
脈沖時間：5 ms；
重復次數：1–2 次。
電壓：250–300 V（0.4 cm 杯）；
電容：250 μF；
電阻：∞；
哺乳動物細胞（指數波）：
細菌（方波）：
保存設置（可選）
使用界面保存為自定義 protocol，便于重復實驗調用。
插入電擊杯
將裝有樣品的比色皿放入 ShockPod 中；
關閉蓋子或壓緊槽位確保安全接觸。
按下【Pulse】鍵
系統釋放脈沖；
屏幕將顯示電壓、脈沖時間與電阻結果；
若出現電弧，需重新準備樣品并檢查液面。
立即移出樣品
將細胞從比色皿轉移至溫熱的培養液中進行恢復（如添加預熱DMEM + FBS）；
靜置 5–10 分鐘后可接種入培養皿或離心收集繼續實驗。
取出比色皿，清洗干燥備用；
關閉主機電源，斷開電源插頭；
清潔 ShockPod 電擊槽（干布擦拭）；
如長時間不使用，請覆蓋防塵罩保存設備。
| 問題 | 可能原因與建議解決方法 |
|---|---|
| 電弧（Arc） | 比色皿中有氣泡、液面過高、離子強度太高 |
| 脈沖時間異常短 | 設置不當、細胞濃度過高、電阻太低 |
| 轉染效率低 | 緩沖液不兼容、DNA質量不高、電壓過低 |
| 細胞死亡率高 | 電壓過高、電容過大、處理液未冷卻 |
杭州實了個驗生物科技有限公司
